血液總RNA大量提取試劑盒的操作指南,
血液樣品
A: 無保護直接凍存血液(血液RNA保存的時候,一定要先處理了才保存,直接把抗凝血液凍到負80冰箱,RNA肯定降解,至少部分降解。)
提取凍存的血液RNA的時候,你沒有太多選擇,只有選擇RN23 RNAliquid 超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒,因為你不可以先融解凍血,然后再裂解紅細胞,因為細胞冰凍后已經受損破裂,RNA酶釋放出來了,這個時候,不能裂解紅細胞再去折騰了,必須使用可以直接裂解全血的裂解液,乘RNA酶還沒有wq降解RNA的時候,就抑制住RNA酶,然后往下面提取。
B: 新鮮的血液
(1) 可以選擇RN25 RNAblood 超純全血總RNA快速提取試劑盒,這個原理就是先紅細胞裂解液裂解紅細胞得到白細胞,然后Trizol(TRIpure)裂解白細胞,{zh1}離心柱子漂洗。
(2) 也可以用RN23 RNAliquid 超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒。
(3) RN06 EASYspin 全血RNA快速提取,這款和Qiagen的qiaamp blood RNA KIT一樣,優點是不用苯酚,氯仿(trizol)毒性物質。缺點是殘留DNA多,還要加DNA酶消化,如果RNA做熒光定量PCR,不推薦這款。
(4) {zh1},你經費特別緊張,也可以選擇RN23的不用離心柱的版本。RN02 TRIpure LS Reagent,LS就是liquid sample的意思,液體樣品RNA提取試劑,就是專門提取液體樣品的TRIzol版本。這個缺點就是不用離心柱子純度差一點(當然一般不影響試驗結果),繁瑣一點,對操作技術的要求高一點,樣品量太小也不適合。
總結:如果是新鮮血樣品,首先推薦RN25 RNAblood 超純全血總RNA快速提取試劑盒或者RN23 RNAliquid 超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒;如果你是冰凍血,別無選擇,只有推薦RN23 RNAliquid 超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒;需要處理,運輸,保存血液樣品后再提取也是推薦RN23 RNAliquid 超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒。
艾德萊生物,RNA提取技術{dy}。