高通量高質量的全血基因組DNA提取(可達芯片級)
從全血中提取DNA是一項古老又基本的分子生物學的工作,根據(jù)不同的下游的實驗和分析,歷史上使用方法種類非常多,傳統(tǒng)酚氯仿抽提法,高鹽鹽析法,硅膠模離心柱吸附法,磁珠法,等等。各種方法都有自己的優(yōu)點和缺點。隨著時代的發(fā)展,尤其是近年來,各種高通量的下游應用,比如血庫HLA分型,芯片制作,遺傳分析,市場需要一種低成本,速度快,操作簡單,高通量的全血DNA提取方法。 在這個背景下,硅膠膜離心吸附柱型的產(chǎn)品成了很多客戶的{sx}。
原因分析如下:
1. 隨著技術的進步,尤其是PCR/RealTime PCR擴增的技術進步,很多樣品的需求量大大減少,幾百個納克到幾個微克足夠,而最常見的離心柱型小量提取,正好可以提取幾個微克到十幾微克的樣品。wq可以滿足下游試驗的需要。
2. 離心柱操作不使用苯酚,氯仿有毒害物質。方便快捷,裂解后配合蛋白酶K消化,過柱子,漂洗,洗脫,幾個簡單步驟就可以完成全部過程。適合于標準化高通量操作,對操作技巧要求低,即使初學者提取也可以得到穩(wěn)定的結果。
3. 聯(lián)合的蛋白酶K消化,和漂洗,可以確保了高純度的可能性。是目前所有方法中,純度{zg}的一種全血DNA提取方法。
4. 國外的公司為了追求高利潤,將該類產(chǎn)品價格定位非常高。每個樣品的價格高達3,40元人民幣。極大的限制了該產(chǎn)品的應用。近年來,在北京艾德萊為典型的研發(fā)人員的不懈努力下,大力改進創(chuàng)新,質量超過進口,尤其是純度方面,全面超越進口可以輕松應用于芯片等純度要求{zg}的應用。價格也只有進口的十分之一。因此該產(chǎn)品在國內大量替代進口產(chǎn)品,并迫使進口公司大幅度降價。
國家人類基因組南方研究中心遺傳部全血DNA提取艾德萊和Qiagen產(chǎn)品測試結果:
2011年1月6日,國家基因組南方中心。本次測試5個樣本,均為保存7,8年的陳舊血,且反復凍融,有的血顏色很淡,稀薄。這是艾德萊產(chǎn)品(DN01)500ul全血提取結果(2微升DNA上樣,marker 4微升)。膠孔無任何殘留。進一步優(yōu)化操作步驟后,質量更好,輕松上芯片。
詳細請參見:
http:///experiment/430/431/434/31073.htm