CAPS試劑即環己胺丙磺酸,是一種氨基磺酸鹽,具有兩性,應用最廣泛的就是在水性聚異氰酸酯涂料中以及HPLC分離、SDS-PAGE凝膠電泳等生化實驗的生物緩沖液中。
作為生物緩沖液時,CAPS與Tris、MOPS類似,都可用于電泳緩沖液,但又有區別,我們可以先了解下電泳緩沖液的要求。電泳是指帶電粒子在電場作用下,想著與其電性相反的電極移動,在確定條件下,帶電粒子的移動速率(遷移率)固定。生化實驗中,帶電粒子通常是蛋白質膠粒、核酸等,不同的蛋白質或核酸遷移率不同,從而會相互分離。由于蛋白質和核酸顆粒對pH非常敏感,所以電泳液中必須加入緩沖劑來保護蛋白質或者核酸。
環己胺丙磺酸CAPS
在外加電場的電壓固定和電泳時間等條件相同時,不同的電泳粒子遷移率不同,所以蛋白質或核酸的大小不同或種類不同,遷移率就不同。不同粒子的遷移率差值即分開距離與電壓和電泳時間成正比。根據電泳粒子的大小不一,其使用的電泳緩沖液也不一樣。
CAPS緩沖液:適用于高分子量的蛋白質(大于20KD)的電泳,即western blot。由于CAPS制成的電泳緩沖液中只含有EDTA、甲醇,蛋白質凝膠電泳PVDF不僅用于蛋白質的分離,也可以用于后續的蛋白質測序。
Tris緩沖液:通常用于核酸Dna的電泳,即Southern blot。其中TEA用于大于13kb的Dna片段,分離效果好,可用于回收Dna;TBA用于小于1kb的Dna片段,不過其中的硼酸會影響Dna回收及后續的酶反應實驗。Tris也可以用于低分子量蛋白的印跡實驗,不過要進行蛋白質測序時不能用帶有甘氨酸,需要用Tris-Tricine+EDTA緩沖體系。
MOPS緩沖液:電泳時通常用于配制RNA電泳緩沖液,即Northern blot。
除了上述的CAPS、Tris、MOPS之外,還有一些其它的電泳緩沖液,在整個電印跡實驗中,緩沖液的成本與核酸染料、蛋白質等比起來占比是較少的,建議使用優質的緩沖劑原料確保實驗效果,德晟專門從事各種生物緩沖劑研發生產的,可以滿足不同實驗的緩沖劑要求。