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延伸內容
詳情介紹: iTRAQ和tmt的技術原理wq一樣,不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質),iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據iTRAQ/TMT標簽的質量數差異,通過MS實現對多組樣品中的蛋白質進行相對定量:SILAC是通過一級MS( MSl)對蛋白質進行定量,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進行定量的iTRAQ/TMT幾乎能兼容有來源的蛋白質樣品,并且能同時分析多達8-10組的樣品,分析通量高。iTRAQ定量蛋白質組學1、分別提取蛋白質并定量;2、Trypsin分別對蛋白進行酶解,提取肽段;3、用不同質量數的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記:4、標記完成后,混合樣品,用SCX進行組分分離(15-20組分);5、對每個組分進行LC-MS分析:6、蛋白質鑒定與定量分析,篩選差異表達的蛋白;7、生物學實驗驗證(Western blot,EUSA等):iTRAQ定量蛋白質組學技術優勢1、高通量,能同時進行多達8-10組樣品蛋白質組的定性與定量分析;2、幾乎兼容有來源的樣品(動植物組織、xj、血液等);3、實驗周期。
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