關鍵詞:生物緩沖劑、HEPES、4-羥乙基哌嗪乙磺酸
HEPES中文全稱 4-羥乙基哌嗪乙磺酸,CAS號為:7365-45-9,pH 緩沖范圍6.8 - 8.2 ,在25℃下,其pKa 值為7.5。HEPES-Na即N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)鈉鹽,其CAS號為75277-39-3。HEPES和HEPES-Na都是非常重要的生物緩沖劑,在生物制藥、醫療診斷等領域有廣泛應用。
生物緩沖劑系列產品包裝
HEPES是一種兩性離子緩沖劑,應用于針對各種類型有機體的細胞培養基、蛋白質研究,還可用于生化診斷試劑盒、Dna/Rna提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里,因具有對細胞md性作用且能長時間控制恒定的pH范圍等優點,常備用作化妝品添加劑,起到活性劑、脫皮劑、促透劑等作用。
HEPES和HEPES-Na的區別:HEPES-Na又稱有機HEPES堿,與HEPES是共軛酸堿的關系,兩者本質上一樣,不過兩種物質溶解后的pH不同。
HEPES的制備方法:
關于HEPES緩沖溶液的配制,根據用途配制,一種是單純的HEPES+NaOH,另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結如下:
一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液調節至少所需pH(HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。
二、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液調節pH值,{zh1}定容。
三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制
將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水,用0.5M NaOH調節至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。
HEPES-Na的制備方法:
HEPES-Na可以通過4-羥乙基哌嗪與乙烯基磺酸鈉合成,也可以采用羥乙基磺酸、氫氧化鈉及4-羥乙基哌嗪高壓合成,目前符合生物緩沖劑要求的最廣泛的制備方法是將HEPES與NaOH反應生成HEPES-Na。具體制備步驟如下:
氮氣保護下將純度在90-99%之間的HEPES和NaOH固體或溶液進行反應0.2-1小時,反應溫度為20-100℃,反應完成后,將所得產物進行脫色、過濾、濃縮、除水、結晶、洗滌、干燥等操作,得到HEPES-Na。
這種制備方法工藝簡單,操作方便,且所得HEPES-Na產物收率高,產品純度高,可達到生物緩沖劑的純度要求。
德晟研發生產生物緩沖劑系列產品(TRIS、HEPES、CAPS、MOPS、PIPES)有15年經驗,在采血管添加劑(肝素鋰、肝素鈉、二鉀、三鉀),顯色試劑(TOOS、MAOS、TOPS、ALPS),化學發光試劑(魯米諾、異魯米諾、吖啶酯)有較深的研究,選料生產包裝層層把關,堅持為客戶提供優質的產品原料。