蕓苔素內酯含量的測定方法
1、 方法提要
樣品用乙酸乙酯溶解,與苯硼酸衍生化后,以乙腈+水(80+20)為流動相,用Shim-pack CLC-ODS柱和可變波長紫外檢測器在222nm波長下進行反相HPLC分離和外標法定量測定。
2、 試劑和溶液
蕓苔素內酯標準品:我公司生產已知含量>98.0%;
乙腈:HPLC級;
乙酸乙酯:AR級;
水:新制二次蒸餾水;
苯硼酸:已知含量;
苯硼酸溶液:1.0mg/mL苯硼酸乙酸乙酯溶液
3、 儀器
高效液相色譜儀:具有可變波長紫外檢測器;
色譜數據處理機或工作站;
色譜柱:不銹鋼柱, Shim-pack CLC-ODS 6.0mm(i.d.)*150,5um;
超聲波脫氣裝置;
旋轉蒸發儀;
恒溫水浴鍋;
真空泵
4、 色譜操作條件
流動相:乙腈+水=80+20(V/V);
流速:1.0mL/min;
柱溫:37℃;
測定波長:222nm;
靈敏度:1.0Aufs;
進樣量:10.0uL;
蕓苔素內酯保留時間:17.4min(24-表),13.6min,15.9min,19.0min為蕓苔素異構體。
5、 測定對照圖譜
蕓苔素內酯標準品色譜圖
純度:92.5%