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MT金屬硫蛋白
金屬硫蛋白的理化性質
一般來說，哺乳動物的MT分子量為6000～7000道爾頓，但去金屬后即硫蛋白分子量為6 000道爾頓左右，而真核微生物的MT分子量范圍較大，為2000～10000道爾頓，如從粗糙脈孢菌中分離出來的MT分子量為2500道爾頓左右，酵母菌中分離得到的MT分子量為8000～10000道爾頓。高等植物的MT的分子量為10000～13800道爾頓。MT的等電點pI一般在4左右，如哺乳動物MT的等電點在3.9～4.6之間，已發現的水生生物MT的等電點在3.5～6.0之間。使各種金屬硫蛋白中50%的金屬離子發生解離的pH分別為Zn-MT 3.5～4.5,Cd-MT 2.5～3.5，Cu-MT pH﹤1.0，但對植物中的MT來說，相應的pH要偏高些。MT的存在形式及穩定性與它所結合金屬的種類，是否結合了金屬及環境的pH密切相關。同樣，MT的光吸收特征除了與它的氨基酸組成有關外，也與它所結合的金屬種類密切相關。

金屬硫蛋白的分類及分布
MT的結構在生物進化中高度保守，有四種異構體，MT-Ⅰ和MT-Ⅱ在大多數哺乳動物的內臟器官中廣泛存在，尤以肝、腎細胞為主，而且參加其功能調節。MT-Ⅲ分布主要限于zssj系統，主要分布于星性膠質細胞（集中于細胞體和突起中），其次為神經元細胞，也有報道稱少量分布于生殖細胞、小腸、胃、腎和嗅覺皮質細胞中。MT-Ⅳ主要分布于皮膚、舌、消化道等器官的角質細胞和復層鱗狀上皮細胞中。

MT粗制品的制備
1）稱重：將前一夜放-4℃冰箱中解凍的試樣拿出來用托盤天平稱重，試樣重量M，jq到0.1g； 　
2）攪碎：將試樣用剪刀剪成碎片后，用搗碎機搗約30～50s，搗成勻漿； 　　
3）提取：加入相當于試樣重量兩倍體積的0.02MTris-HCl，用磁力攪拌器攪約半分鐘； 　　4）變性：加入等體積氯仿：乙醇（0.08：1）變性除雜蛋白，攪拌約5分鐘； 　　
5）離心：5000rmp、4℃離心25min，棄沉淀，取上清； 　　
6）熱變性：75℃熱變性3～5min除雜蛋白； 　　
7）過濾：用冰塊速冷后用8層紗布過濾，取清液，靜置約2h； 　　
8）離心：8000rmp、4℃離心25min，棄沉淀，取上清，得到勻漿液。 　　
9）層析、凍干：對勻漿液進行層析，然后收集富含MT的層析液進行凍干即得MT粗品。

金屬硫蛋白的純化方法
所謂純化，也就是MT粗品（60%～90%）、MT精品（≥90%）以及純品（≥95%）的形成過程。由報道的資料看，純化方法大概是一致的，首先是根據MT-1和MT-2所帶電荷不同的性質，進行離子交換將MT-1和MT-2分開，然后將收集MT-1和MT-2的層析液分別進行脫鹽，{zh1}收集凍干、保存。 　　取勻漿液直接上Sephadex G-50柱（4.5×100cm）進行分離，以0.01mol/L Tris-HCl，pH8.6緩沖液洗脫。收集含MT組分層析液，再上預先用0.01mol/L Tris-HCl，pH8.6緩沖液平衡好的DEAE-Sepharose Fast Flow（3×70cm）柱進行離子交換層析，以Tris緩沖液進行直線梯度洗脫（A液：0.01mol/L Tris-HCl，pH8.6； B液：0.25mol/L Tris-HCl，pH8.6）。分別收集含MT-1和MT-2組分，冷凍干燥濃縮成體積15～20mL，再分別上預先用0.01mol/L碳酸銨平衡好的Sephadex G-25柱（1.6×120cm）進行脫鹽。所得MT-1和MT-2冷凍干燥后保存于-20℃冰箱中。