LR3-IGF1生物活性能力比IGF-1高10倍,比胰島素高200-1000倍。 LR3-IGF1 與IGF-1在細(xì)胞內(nèi)起到同樣的功能,即與受體結(jié)合后,啟動(dòng)兩條信號(hào)傳遞鎖鏈:PI-3 激酶jh途徑和MAP 激酶jh途徑,把有絲分裂和代謝信號(hào)傳遞到細(xì)胞核內(nèi),從而啟動(dòng)IGF-1 促進(jìn)細(xì)胞增殖和代謝的生物學(xué)作用。
重組人長鏈胰島素樣生長因子1(LR3-IGF1)是胰島素樣生長因子1的類似物。(LR3-IGF1同IGF-1相比,N端多13個(gè)氨基酸鏈(L)且IGF-1第三位的谷氨酸被精氨酸所代替(R3)。trIGF-1包含70個(gè)氨基酸(7.4KDa),LR3-IGF1包含83個(gè)氨基酸(9.11KDa)。同樣都含有6個(gè)半胱氨酸,3對(duì)二硫鍵的三級(jí)結(jié)構(gòu)。LR3-IGF1生物學(xué)活性能力比IGF-1高10倍;比胰島素高200-1000倍。
重組的胰島素樣生長因子1(LR3-IGF1)在Rosetta(DE3)plysS中獲得了{(lán)gx}表達(dá),目的蛋白約占菌體總蛋白的30%,40L發(fā)酵罐中的蛋白質(zhì)水平可達(dá)1.73g/kg。菌體經(jīng)超聲破碎制備包涵體,經(jīng)變性、復(fù)性,SP-F.F、Phenyl-F.F層析和Sephacryl S-100凝膠過濾三步純化,得到分子量為9.1kD單一條帶的目的蛋白,經(jīng){gx}液相HPLC分析純度達(dá)到98%,目的蛋白的收率為30%,生物活性鑒定重組的胰島素樣生長因子具有刺激Bale/3T3細(xì)胞增長的特異性,其ED50在1.0ng/ml左右;還根據(jù)中國藥典對(duì)純化品的雜質(zhì)含量進(jìn)行了測定,產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到藥用級(jí)別。
應(yīng)用領(lǐng)域:
1.無血清細(xì)胞培養(yǎng)所必須的細(xì)胞因子。
2.促進(jìn)骨胳增長、參與創(chuàng)傷愈合。
3.重癥肌無力
4.局部使用可促進(jìn)受損傷坐骨神經(jīng)的再生,還可以用于提高人體肌肉生成。