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皮膚變態反應試驗
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皮膚變態反應試驗

皮膚變態反應試驗

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通標標準技術服務有限公司廈門分公司

SGS集團創建于1878年,是全球檢驗、鑒定、測試和認證服務的{ldz}和創新者。集團擁有遍布全球的1,500多個分支機構和實驗室,員工人數達75,000名。憑借{zy1}的專業經驗和服務誠信,SGS提供的檢驗和測試報告、認證證書已經成為眾多跨國公司、貿易商評估和甄選供應商的重要標準。 SGS-CSTC通標標準技術服務有限公司成立于1991年,是SGS集團和隸屬于原國家質量技術監督局的中國標準技術開發公司共同建立的合資公司,是合法從事檢驗、鑒定、測試和認證服務的..
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1 范圍
本規范規定了動物皮膚變態反應試驗的基本原則、要求和方法。
本規范適用于化妝品原料及其產品安全性毒理學檢測。
2 規范性引用文件
OECD Guidelines for Testing of Chemicals(No 406,July 1992)
USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines(Series 870.2600,Aug.1998)
3 試驗目的
確定重復接觸化妝品及其原料對哺乳動物是否可引起變態反應及其程度。
4 定義
4.1 皮膚變態反應(過敏性接觸性皮炎)(Skin sensitization,allergic contact dermatitis)
是皮膚對一種物質產生的免疫源性皮膚反應。在人類這種反應可能以瘙癢、紅斑、qz、
水皰、融合水皰為特征。動物的反應不同,可能只見到皮膚紅斑和水腫。
4.2 誘導接觸(Induction exposure)
指機體通過接觸受試物而誘導出過敏狀態的試驗性暴露。
4.3 誘導階段(Induction period)
指機體通過接觸受試物而誘導出過敏狀態所需的時間,一般至少一周。
4.4 激發接觸(Challenge exposure)
機體接受誘導暴露后,再次接觸受試物的試驗性暴露,以確定皮膚是否會出現過敏反應。
5 試驗的基本原則
實驗動物通過多次皮膚涂抹(誘導接觸)或皮內注射受試物 10d~14d(誘導階段)后,
給予激發劑量的受試物,觀察實驗動物并與對照動物比較對激發接觸受試物的皮膚反應強
度。
5.1 實驗動物和飼養環境
一般選用健康、成年雄性或雌性豚鼠,雌性動物應選用未孕或未曾產仔的。
實驗動物及實驗動物房應符合國家相應規定。選用常規飼料,飲水不限制,需注意補充
適量Vc。
5.2 動物試驗前準備
試驗前動物要在實驗動物房環境中至少適應3d~5d 時間。將動物隨機分為受試物組和對
照組,按所選用的試驗方法,選擇適當部位給動物備皮(去毛),避免損傷皮膚。試驗開始
和結束時應記錄動物體重。
5.3 無論在誘導階段或激發階段均應對動物進行全面觀察包括全身反應和局部反應,并作
完整記錄。
5.4 試驗方法可靠性的檢查
使用已知的能引起輕度/中度致敏的陽性物每隔半年檢查一次。局部封閉涂皮法至少有
30%動物出現皮膚過敏反應;皮內注射法至少有60%動物出現皮膚過敏反應。陽性物一般采
111
用2,4-二硝基氯代苯,肉桂醛,2-巰基苯并噻唑或對氨基苯酸乙酯。
6 試驗方法
6.1 局部封閉涂皮試驗(Buehler Test,BT)
6.1.1 動物數
試驗組至少20 只,對照組至少10 只。
6.1.2 劑量水平
誘導接觸受試物濃度為能引起皮膚輕度刺激反應的{zg}濃度,激發接觸受試物濃度為不
能引起皮膚刺激反應的{zg}濃度。試驗濃度水平可以通過少量動物(2~3 只)的預試驗獲得。
水溶性受試物可用水或用無刺激性表面活性劑作為賦形劑,其它受試物可用80%乙醇
(誘導接觸)或丙酮(激發接觸)作賦形劑。
6.1.3 試驗步驟
6.1.3.1 試驗前約24h,將豚鼠背部左側去毛,去毛范圍為4cm2~6cm2。
6.1.3.2 誘導接觸:將受試物約0.2mL(g)涂在實驗動物去毛區皮膚上,以二層紗布和一
層玻璃紙覆蓋,再以無刺激膠布封閉固定6h。第7d 和第14d 以同樣方法重復一次。
6.1.3.3 激發接觸:末次誘導后14d~28d,將約0.2mL 的受試物涂于豚鼠背部右側2cm×2cm
去毛區(接觸前24h 脫毛),然后用二層紗布和一層玻璃紙覆蓋,再以無刺激膠布固定6h。
6.1.3.4 激發接觸后24h 和48h 觀察皮膚反應,按表1 評分。
6.1.3.5 試驗中需設陰性對照組,使用6.1.3.2 和6.1.3.3 的方法,在誘導接觸時僅涂以溶劑
作為對照,在激發接觸時涂以受試物。對照組動物必須和受試物組動物為同一批。在
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