固定 具有凝固或沉淀組織蛋白的作用,因此能抑制酵解酶類的活動和xj的繁殖,從而呈現對組織的固定作用 (1)10%福爾馬林液:1份甲醛液 + 9份蒸餾水市場上出售的甲醛液約含37-40%的甲醛,10%福爾馬林液實際上僅含3.7-4.0%的甲醛 適用范圍:各種組織。但是經10%福爾馬林液固定的組織,細胞核染色較好,而細胞質染色較差 處理:組織塊一般固定24h以上,長時間亦可,甚至可用來長期保存組織塊。短時間固定的組織塊不需水洗,可直接轉入70%酒精脫水 (2)Bouin氏液: 苦味酸飽和水溶液(1.22%) 75ml 甲醛液 25ml 冰醋酸 5ml 適用范圍:各種動物組織及植物組織的根尖,是動物組織良好的固定液 處理:固定24h,也可在此液長期保存。流水沖洗或不經水洗直接入70%酒精脫水。
組織切片指以生物組織為材料,處理為薄片,應用于玻片以適合顯微鏡之觀察。此為組織學發展的重要工具及方法。常伴隨著顯微鏡技術的發與玻片的制作技術改進而發展。組織切片廣泛應用在生物學、醫學(病理學、傳染病學等)、農學(植物病理學)等領域。
切片的種類
生物學里的切片是指將材料以工具(如刀片、切片機)切成適合以顯微鏡觀察的薄片之手續;或者完成此手續后的標本亦稱為切片。
常見的切片種類,依照材料的性質及處理方法有:徒手切片、木材切片、埋蠟切片、透明法、解離法、涂抹法等[1]。若以較嚴格的定義來看,涂抹法所制成的玻片常被稱為抹片,解離法、透明法等制作的玻片標本亦不稱為切片。
依照玻片的保存性質可分為臨時片及{yj}片;若以使用工具及方式,則有徒手切片或使用切片機.
脫水
①以上各級乙醇脫水時間可根據組織塊的大小適當調整。對于小的組織塊(如胃黏膜、支氣管粘膜等)可適當減少脫水時間,對于較大的組織塊可適當增加脫水時間,但各級乙醇最長不要超過12h,無水乙醇不要超過4h。如中途因故不能繼續進行下去,則可將標本退回至80%乙醇中保存。另外,脂肪組織和疏松結締組織一般應延長脫水時間,在95%乙醇中水分必須脫凈,脂肪必須溶解掉(50%以上濃度的乙醇可溶解脂肪和類脂質)。否則,石蠟不能滲入脂肪細胞和纖維組織,無法切出好的切片,而且染色時也易脫片。
②若組織含水分過多(如胚胎組織),則脫水劑濃度應由更低級乙醇(如30-40%乙醇)開始,這對保證制片質量十分重要。
③若脫水不盡,切片后蠟塊切面組織常出現凹陷(因蠟塊中bao埋的組織與空氣接觸后即干燥收縮)。這樣的蠟塊,雖能勉強切出切片,但染色效果極差,染色時組織也容易脫落。因此,脫水必須徹底,脫水徹底與否是制片質量好壞的一個重要環節。
④脫水劑的容積應為組織塊總體積的5-10倍,脫水劑應及時過濾,更換。