沖洗：  材料自固定液中取出后，需立即沖洗，使其中所有的固定液全部除去，以妨礙染色 有些固定液，如10%福爾馬林液、Bouin氏液固定的材料，若時間較短的話可不必沖洗。但時間過長亦需沖洗  3、脫水（37度恒溫箱）  所謂脫水就是利用脫水劑將組織內的水分置換出來，以利于有機溶劑的滲入，這一過程稱為脫水。  脫水是否徹底，直接關系到組織是否能充分透明   脫水過度（原因是組織在純酒精內時間過久，發生組織質地發生變化）容易造成組織發脆。造成組織發脆的原因還有加溫（溫度超過36℃）、脫水劑內加有丙酮、浸蠟用的石蠟

中二甲苯過多等等。一般我們總認為組織發脆跟高濃度酒精有關，而忽視了與低濃度的酒精關系，其實低濃度的酒精具有強大的穿透力，比純酒精更容易滲透到組織塊內部使之脫水，組織如果在低濃度酒精里充分脫水，在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份，因此，僅需短時間就可完成，如果這時不縮短純酒精的時間，便會引起組織發脆；如果脫水時加溫，使用丙酮，還可引起組織收縮，并影響免疫組織化學的標記.

脫水：即脫去組織內的水分，借著某些溶媒置換組織內水分的過程。一般經過固定的組織內常含有較多的水分，而水是不能與蠟相混合的，因此，在浸蠟之前必須脫去組織塊中的水分。乙醇是最常用的脫水劑，可與水隨意混合，脫水能力強，并可硬化組織。其穿透組織的速度很快，常導致組織塊收縮、變脆。因而，在使用乙醇脫水的時候，應先從低濃度開始，然后再依次遞增乙醇的濃度，使用不同濃度的乙醇逐步將組織塊內的水分置換出來。

顯示葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）活性的鉛法：

（Glucosel-phosphate phosphohydrolase）

①酶的定位及其生物學意義：

該酶主要位于內質網，是內質網的標志酶。G-6-Pase參與糖謝，能水解葡萄糖-6-磷酸而釋放出葡萄糖和磷酸。

⑵原理：G-6-Pase將底物（葡萄糖-6-磷酸鉀鹽）水解產生磷酸離子，后者被孵育液中的硝酸鉛所捕獲，最終反應物為顆粒狀的硫化鉛沉淀，其反應式如下：

酶Pb(NO3)2

葡萄糖-6-磷酸鉀+H2O葡萄糖+磷酸

⑶結果：酶活性部位呈棕色硫化鉛顆粒沉淀。在光鏡下G-6-Pase活性顆粒較均勻地分布于胞質中。